ХАРЬКОВ МЕДИЦИНСКИЙ. |
|
ПСА заг. - IФАООО НПЛ "Гранум"Інструкція по використанню тест-системи імуноферментної для визначення загального простата-спецефічного антигена в сиворотці та плазмі крові (ПСА заг. - IФА) Державний реєстраційний номер № 1247/2002 Тільки для досліджувань in vitro. Набір вироблений по технології та з компонентів фірми Хема-Медіка, Москва. Введення
Загальний простата-специфiчний антиген (ПСАз) являє собою глікопротеїд з молекулярною масою 34 кДа, що складається з одного поліпептидного ланцюга. ПСА, виробляється епітеліальними клітинами здорової простати та функціонує як серинова протеаза для зменшення в’язкостi сперми. При гіперплазiї і злоякіснiй трансформацiї простати збiльшується виробка та секрецiя ПСАз в крові. Зміст ПСАз в сироватцi кровi збільшується з віком, особливо у чоловіків пiсля 40 років. Показаннями до визначення ПСАз: проведення масового скрининга в чоловiкiв старшого вiку, діагностика та мониторинг лiкування раку предстатевої залози. У наданiй тест-системi використовується принцип двосайтового (сендвiч) iмуноферментного аналiзу. У лунки мiкропланшета, на поверхнi якого адсорбованi специфiчнi анти-ПСАз-антитiла, вносять дослiджуваний зразок. Антиген iз зразка зв'язується з антитiлами на поверхнi лунки. Незв'язаний матерiал видаляється вiдмивкою. У лунку вносять другi антитiла проти iншого епiтопу ПСАз , мiченi пероксидазою. Активнiсть ферменту, зв'язаного на поверхнi лунки мiкропланшету, проявляється i вимiрюється додаванням хромоген-субстратної сумiшi, стоп-розчину та фотометрiєю при 450 нм. Iнтенсивнiсть кольорової реакцiї прямо пропорцiйна кiлькостi специфiчних антитiл у зразку.
Важливі зауваження по збереженню реагентів і виконанню тесту. 1. Не змішуйте і не використовуйте в одній постановці реагенти різних серій. 2. Після використання реагенту негайно закривайте кришку флакона чи пробірки. Увага: закривайте кожен флакон своєю кришкою. 3. Усі компоненти набору повинні зберігатися в холодильнику (+2…+100С ). Не заморожуйте набір. 4. Після розкриття пакета ретельно заклейте лунки, що залишилися, стрічкою для закліювання, яка входить до складу набору, щоб запобігти впливу вологи пiд час зберiгання. 5. Увага! Під час всіх інкубацій необхідно заклеювати планшет клейкою стрічкою. Не допускайте пересихання лунок мікропланшета між стадіями постановки. 6. Усі проби і стандарти бажано ставити в двох паралелях (повторах). 7. Досліджувані сироватки повинні бути ретельно отцентрифуговані. Не використовуйте мутні, хильозні та гемолітичні зразки. 8. Якщо аналіз виробляється не в день узяття крові, сироватку варто зберігати при -200С. Повторне заморожування-відтавання не допускається. 9.Відмивання мікропланшета може проводитися як вручну, так і з використанням автоматичних пристроїв. Вносите не менш 200 мкл відмивочного буфера у лунки при кожному відмиванні. Затримка при відмиванні («замочування») не потрібна. Після закінчення ручного відмивання різко перегорнiть мікропланшет на фільтрувальний папір для видалення залишків буфера. 10. Вимірюйте оптичну щільність протягом не більш 15 хвилин після зупинки реакції із субстратом. |
|
©2004-2005 LotusSoft. Все права защищены. |