Главная
/
Медицинские публикации
/
Авторы
/
ООО НПЛ "Гранум"
/
АСЛ-О - латекс-тест
Інструкція
по використанню діагностикуму латексного
для виявлення антистрептолізину - О
в сироватці крові людини (“АСЛ-О - латекс-тест”)
(Державний реєстраційний номер № 1248/2002)
Антистрептолізин – О (АСЛ-О) – антитіла проти стрептококового гемолізину – О (стрептолізину-О). АСЛ-О – маркер гострої стрептококової інфекції. Рівень АСЛ-О підвищується в гострий період інфекції та знижується в період реконвалесценції та одужання. В клінічній практиці визначення АСЛ-О використовують для спостерігання за динамікою ревматичного процесу. Діагностичне значення має стійке падвищення активності АСЛ-О.
Підвищення АСЛ-О відзначається також у хворих ревматоїдним артритом, хоча рівень його підвищення значно нищий, чим у хворих ревматизмом.
Підвищення рівню АСЛ-О характерно для ревматизму, гострої стрептококової інфекції (ангіни, скарлатини, піодермії, гнійних запальних процесів, гострого нефриту), хронічного тонзилиту, гломерулонефриту.
Принцип методу
Оснований на виявленні в сироватці крові людини антистрептолізіну-О (антитіл до антигену стрептококу), який вступає в реакцію аглютинації з антигеном стрептолізіном-О (СЛ-О), що адсорбований на нейтральних частинках латексу.
Склад набору (реагенти)
1. Реагент №1 - СЛ-О - латексний реагент (2) мл.
2. Реагент №2 - Розчинник (10) мл.
3. Реагент №3 - Контрольний позитивний зразок (0,1) мл.
4. Реагент №4 - Контрольний слабо позивний зразок (0,1) мл.
5. Реагент №5 - Контрольний негативний зразок (0,1) мл..
Досліджуваний матеріал
Використовують свіжу, вільну від домішок сироватку крові. Зберігають зразки не більше 72 годин при +2+80С. Довгострокове зберігання допускається в замороженому вигляді при температурі мінус 200С. Повторні заморозка та розтавання не рекомендуються.
Використання гемолізованих та ліпідемічних зразків не рекомендуються.
Підготовка реагентів та проведення дослідження
Перед постановкою дослідження набор витримують при кімнатній температурі протягом 30 хвилин.
1. Якісне визначення
Наносять на скляну пластинку чи тестовий слайд послідовно реагенти №3 - №5 по 10 мкл з інтервалом 2-3 см, потім на вільні місця наносять по 10 мкл досліджуваного матеріалу.
Легким струшуванням флакону перемішують реагент №1 і добавляють по 10 мкл в кожну краплю контрольного та досліджуваного матеріалу, перемішують скляною паличкою.
Похитують пластину протягом 3 хвилин. Оцінку результатів дослідження проводять через 5-6 хвилин. Більш пізню аглютинацію розцінюють як неспецифічну.
2. Кількісне визначення
З допомогою реагенту №2 готують розведення досліджуваного матеріалу – 1:1,1:2, 1:4, 1:8 і т.д.
На скляну пластинку чи тестовий слайд наносять по 10 мкл кожного розведення досліджуваного матеріалу. Реагент №1 перемішують легким струшуванням флакону і до кожного розведення проби додають по 10 мкл. Перемішують скляною паличкою.
Похитують пластину протягом 3 хвилин, після чого проводять облік результатів дослідження , як вказано для якісного визначення.
Оцінка результатів дослідження
Реакцію вважають позитивною, коли спостерігається аглютинація частин латексу. Величину реакції оцінюють в плюсах: 4 плюси – всі частини аглютиновані, розчин прозорий; 3 плюси – ¾ частин аглютиновані, розчин прозорий по краю; 2 плюси – ½ частин аглютиновані, розчин мутнуватий; 1 плюс – слаба аглютинація, розчин мутний.
При кількісному визначенні оцінку проводять згідно з останнім титром сироватки, який дав позитивний результат.
Для визначення кількості АСЛ в МЕ/мл в пробі, необхідно найбільше розведення сироватки, що дало видиму аглютинацію, помножити на 200 МЕ/мл. Наприклад, якщо аглютинація спостерігалася в титрі досліджуваної сироватки 1:2, то необхідно 2Х200=400 МЕ/мл.
У здорових людей може визначатися до 200-250 МЕ/мл АСЛ в сироватці крові .
Чутливість
Чутливість тесту становить 200 МЕ/мл. Стандартизація виконана по галузевому стандарту ДНВІ стандартизації та контролю медичних біологічних препаратів ім. Л.А.Тарасевича (Росія).
Вимоги безпеки
1. Набор призначений тільки для діагностики in vitro. Категорично забороняється піпетування ротом.
2. Засобами індивідуального захисту при роботі з наборами є марлеві пов’язки та гумові рукавички.
3 Знезараження сироваток, тестових слайдiв чи скляних пластин проводити згiдно з наказом МОЗ СРСР №408 вiд 29.12.89 р. «О мерах по снижению заболеваемости вирусными гепатитами в стране».
Умови транспортування та зберігання
1 Набори транспортують всіма видами закритого транспорту при температурі від +4 до +100С. Допускається транспортування при температурі до 37°С не більше 72 годин.
2 Набори повинні зберігатися при температурі від +4 до +100С. Не допускається замороження!
Гарантії виробника
1 Виробник гарантує відповідність якості наборів вимогам цих ТУ при додержанні споживачем наведених у них умов транспортування та зберігання.
2 Гарантійний термін зберігання становить 1 рік від дня виготовлення набору. Після закінчення терміну зберігання набори підлягають переконтролю з метою перевірки їх працездатності.
|
